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台式KB88凯时客户端密度梯度离心法介绍

發布時間:2017-06-28      點擊次數:2879

  在實際使用中,根據樣品的不同需要使用台式KB88凯时客户端采用不同的分離方法進行分離。分離方法一般有三種,今天介紹密度梯度離心法。

  密度梯度离心也称为平衡密度梯度离心。密度梯度离心是根据样品中各组分的浮力密度差不同进行分离。在离心场中,溶液中颗粒浮力密度小则上浮,浮力密度 大则下沉,上浮和下沉的颗粒会一直延梯度液移动到与其浮力密度恰好相等的位置上,该位置也称颗粒的等密度点,离心时样品各组分颗粒将按其密度大小分别移等密度点形成区带,形成的区带不会因离心时间长而发生变化。离心后收集所需区带颗粒即为纯化组分。离心前后样品的状态如下图所示。

 

  因此,在離心前,樣品可置于梯度液的任意位置,一般是均勻分布在梯度液中。等密度區帶離心法的離心效果取決于樣品顆粒的浮力
密度差,密度差越大,分離效果越顯著,與樣品顆粒的大小與現狀無關。
等密度梯度離心經常使用的梯度液包括氯化铯(CsCI)、溴化鈉等,典型的應用包括質粒DNA(或者其他DNA、RNA核酸片段)的大規模高純度純化,脂蛋白的分離純化等。
質粒DNA的氯化铯等密度梯度離心分離純化流程如下: 
 

  

脂蛋白溴化鈉等密度梯度離心分離純化流程如下:

1)人全血1000 g离心10分钟去除各种血细胞,上清为血清。

2)血清加入NaBr密度梯度液(不連續梯度)的底部,往上依次鋪濃度變小的梯度液。

3)然后在水平转头中,260,000 g离心力14℃下离心24小时,各种密度的脂蛋白从管底浮向它们自己的等密度区形成了纯的各种密度脂蛋白区。而离心管底部保留着各种血清蛋白。
4)用上排法從離心管中抽出格層液體,經DU核酸蛋白分析儀測定,定位各種不同密度血清脂蛋白。 

  以上是蜀科台式KB88凯时客户端密度梯度離心法的介紹,需要相關離心機的朋友更多詳情可以咨詢蜀科儀器。

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